Современная диагностика гепатитов требует не только выявления причины, но и определения стадии болезни, интенсивности поражения печени. Это необходимо для выбора оптимального варианта лечения, прогноза жизни пациента.
Вирусная нагрузка при гепатите С — один из наиболее информативных способов решения проблемы и ответа на вопросы врача. Он основан на качественном и количественном анализе состава рибонуклеиновых кислот (РНК) вируса в крови больного человека. По полученным показателям можно с достоверностью судить о скорости прогрессирования патологии печени.
Какими методами определяют качественные показатели?
Диагностика вирусного гепатита С проводится по специальным чувствительным тестам. Качественный анализ подтверждает или отрицает наличие вируса в клетках крови больного. Результат дается в форме (+) или (-), «да» или «нет». Указывает на заболевание даже в ранней стадии, но не дает возможности установить интенсивность развития поражения печени, «силу» вируса.
Для проведения достаточно специального экспресс-теста и капли крови. Он позволяет обнаружить антитела к вирусу. Можно приобрести в аптеке. Состоит из комплекта пластиковой полоски, пипетки и игольчатого приспособления для прокола пальца. Кровь забирается пипеткой и помещается в указанный отсек.
Результат получают спустя 10–15 минут. Появление двух полосок говорит «да», одной — «нет». Бывает видно еще одно слабо окрашенное пятно. Его можно расценить, как низкую концентрацию антител.
После получения положительного ответа пациент должен обязательно проходить обследование для точного установления диагноза.
Вирусологические тесты дают возможность изучения циклической активности воздействия на печень
Качественные нарушения в организме при гепатите С подтверждаются клинико-биохимическими исследованиями. О высокой степени поражения печеночных клеток и нарушенных функциях органа говорят следующие результаты:
- рост СОЭ, гемоглобина;
- обнаружение уробилина и билирубина в моче;
- увеличенные в разы трансферазы (аланиновая и аспарагиновая);
- снижение протромбинового индекса и альбуминов;
- рост фруктозо-1-фосфатальдолазы Ф-1-ФА, тимоловой пробы; значительное повышение в сыворотке холестерина, триглицеридов, билирубина.
Подтверждением нарушенных функций печени являются ферменты:
- щелочная фосфатаза;
- сорбитдегидрогеназа;
- лактатдегидрогиназа;
- гаммаглутаминтранспептидаза;
- гаммаглутамилтрансфераза.
Их изучают в биохимических лабораториях поликлиники. Резкое отклонение состава требуют дополнительных количественных анализов на вирусную нагрузку.
Способы количественной оценки вирусной нагрузки
Вирус гепатита С в отличие от других имеет множество штаммов (генотипов). Выделено более 9 разновидностей, кроме того, каждый еще подразделяется на 3–4 подтипа. Это предоставляет вирусу возможность мутировать.
Весь генетический материал заключен в РНК и находится в ядерных структурах клетки микроорганизма. Количественный метод используется при выявленном бесспорном диагнозе, когда необходимо установить форму болезни и стадию воспалительного процесса.
Подсчет производится по числу клеток вируса в 1 мл крови пациента. Чем больше РНК вируса гепатита С, тем выше активность поражения. Это указывает на угрозу прогрессирования болезни, распространения на здоровые клетки печени. Если численность клеток ненамного выше нормы, то результат все равно считается вирусной нагрузкой.
Для определения количества РНК в «больных» клетках применяют иммунологические методы. Они заключаются в выявлении специфических антител или, наоборот, антигенов при воздействии известным реактивом.
Для анализа применяются стандартные наборы реактивов
В методике иммуноферментного анализа (ИФА) в сыворотку пациента вводят стандартные антитела, меченные ферментами. Если в крови имеются антигенные структуры вируса гепатита С, то комплексы антиген+антитело изменяют цвет красящего вещества. Количественный подсчет основан на пропорциональном соответствии молекул антигена.
Способ иммуноблоттинга — более чувствителен, сочетает ИФА и предварительное разделение плазмы электрофорезом. Позволяет выявить маркеры гепатита С (антитела и иммуноглобулины). Для исследования используют РНК-блоттинг, белок-блоттинг. Время проведения анализа от трех часов до двух суток.
Радиоиммунологический анализ (РИА) — отличается использованием меченых изотопов для количественной оценки компонентов реакции. Последующая радиометрия выдает окончательную цифру. Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) — не является иммунологическим. Его значимость трудно переоценить.
Дело в том, что даже при крайне малом содержании специфической генной информации из РНК проводится репликация (копирование) цепи аминокислот, что увеличивает общую массу субстрата. Поэтому исследование генома считается наиболее достоверным. Показывает положительный результат при заражении уже на пятый день, задолго до проявления клинической симптоматики. У здорового человека результат будет отрицательным.
Диагностика гепатита С
Одна из рекомендаций ВОЗ — троекратное исследование методом ПЦР для выявления РНК вируса гепатита С. Анализ называется «тест 321».
Эксперты сделали вывод, что только троекратное подтверждение вирусной нагрузки не менее 60 МЕ/мл считается достоверным диагностическим признаком даже на фоне отсутствия других маркеров.
Обычно кровь на ПЦР во время гепатита С сдают в первый раз до лечения, затем после первой, четвертой, двенадцатой и двадцать четвертой недели. Исследование после трех месяцев лечения (12 недель) считается показателем эффективности применяемых препаратов.
Метод раздвоенной ДНК(R-DNK). Считается более дешевым, но менее результативным. Подходит для государственных медицинских учреждений. Позволяет проводить исследование сразу больших коллективов людей. Способен выдать негативный результат при наличии вируса. Более рационально этот метод рекомендуется использовать в качестве дополнительного обследования.
Способ транскрипционной амплификации (ТМА). Наиболее простой и дешевый при достаточной эффективности. Подходит для диагностики гепатита С. Критерием патологии и степень заразности больного при R-DNK считается уровень выше 500 ME, при TMA — от 5 до 10 ME.
Значение концентрации вируса
Чем больше содержание вируса в крови человека, тем он опаснее для окружающих своей заразностью. Эффективность лечения зависит от того, как удается снизить количество вируса. Этот критерий учитывается для прогноза выздоровления.
Комбинацию лекарственных средств подбирают для максимального воздействия на вирус При высокой вирусной нагрузке в течение длительного времени возникает риск поражения не только печени, но и всего организма, повышается вероятность осложнений.
Содержание возбудителя проверяют в динамике. Если удается уменьшить вирусную нагрузку, то медикаменты считаются эффективными, можно переводить больного на поддерживающие дозировки. При отрицательной динамике анализа необходима корректировка дозы или замена препаратов. Общую оценку состояния пациента дает одновременное сопоставление с результатами клинических и биохимических тестов.
Для первого исследования необходим недельный срок. Динамика повторных анализов проводится спустя месяц. При положительном анализе на антитела у людей без симптомов болезни необходимо повторять исследование вирусной нагрузки ежегодно.
Как проводится трактовка результатов исследований?
По итогам выдаются общие качественные результаты (отрицательный или положительный). При выявлении вируса подробно указывается количественное значение с характеристикой степени зараженности.
Расшифровка вирусной нагрузки при гепатите С проводится в международных единицах (МЕ/мл):
- высоким считается показатель — свыше 800 000 МЕ/мл;
- низкой вирусной нагрузкой — меньше 800 000.
Одновременно учитывается в первом случае более 2 млн копий/мл, во втором — менее. При высокой нагрузке говорят об активном воспалительном процессе. В таблице указана более подробная трактовка степени нагрузки.
| Степень | Вирусная нагрузка в МЕ/мл крови |
| низкая | от 600 до 30000 |
| средняя | от 30000 до 800000 |
| высокая | свыше 800000 |
Наиболее частое значение при первичном исследовании на фоне признаков гепатита — примерно 1 100 000 МЕ/мл. Результат считается положительным. Назначается весь комплекс терапии. Если обнаруживают от 400 000 ME и более, считается что вирус не просто присутствует, но и активно размножается, заражая окружающих. Небольшое снижение — показатель благоприятного прогноза на выздоровление.
Отрицательный результат и эффективное лечение подтверждаются полным отсутствием генного материала РНК вируса гепатита С в крови. Его считают достоверным при повторах с большими перерывами. Увеличение вирусной нагрузки после окончания курса лечения и хороших показателей указывает на вероятность рецидива гепатита.
Если в заключении написано: «РНК ниже диапазона измерений», это значит, что генетический материал вируса имеется, но слишком мал для определения конкретного количества данным методом. Подтвердить анализ или опровергнуть можно только с помощью способа полимеразной цепной реакции.
При выявлении положительного анализа на гепатит С у беременной женщины с повышенной вирусной нагрузкой значительно повышается риск заражения плода от больной матери. Приходится решать вопрос о целесообразности сохранения беременности, поскольку применение лекарственных препаратов для лечения может вызвать тяжелые генные мутации у ребенка.
Не следует пытаться трактовать результаты самостоятельно, для этого есть подготовленные специалисты
Возможны ли ошибки в заключении по анализу?
При резких колебаниях значений врач расшифровывает анализ и не исключает возможность ошибки. Она связана:
- с неправильным хранением материала для исследования (крови) после забора на анализ;
- наличием в крови пациента химических соединений лекарств, Гепарина, жидкостей с высоким содержанием белков;
- ошибкой медицинского работника (лаборанта).
Обычно врачи стараются направлять на анализы в одну и ту же лабораторию. Повторное исследование позволяет более внимательно проверить результат.
Кто должен профилактически обследоваться на вирусную нагрузку?
Среди населения выделяется группа риска. Это люди, имеющие большую вероятность заражения гепатитом С. Им предлагается проходить обязательное обследование ежегодно. Рекомендации касаются:
- медицинских работников инфекционных кабинетов, отделений;
- родственников и контактирующих с больными;
- БОМЖей и наркоманов;
- перенесших разные формы гепатита;
- людей, ведущих половую жизнь с частыми сменами малознакомых партнеров, использующих незащищенный секс;
- поклонников татуажа, пирсинга;
- пациентов после хирургического вмешательства, переливания крови;
- детей, рожденных от заболевших матерей;
- больных с заболеваниями печени неясного генеза.
Некоторые доктора считают обязательным обследование лиц при частом лечении у стоматолога, а также женщин в послеродовом периоде, если им переливалась кровь. 
Выявление заражения вирусным гепатитом беременной женщины ставит будущих родителей перед проблемой необходимости прерывания
Нужна ли специальная подготовка перед проведением исследования на вирусы?
Для анализа производится забор крови из вены. Чтобы быть уверенными в достоверности результатов рекомендуется соблюдать следующие требования. Сдавать анализ утром, натощак, если лаборатория работает круглосуточно, следует предусмотреть перерыв в приеме пищи не менее восьми часов.
Не рекомендуется пить перед забором крови на гепатит С чай, сок, кофе, можно употреблять воду. За двое суток нужно отказаться от алкоголя, жирных и жареных блюд. За час — нельзя курить. Перед исследованием запрещены какие-либо физиотерапевтические процедуры, массаж, ультразвуковое и рентгеновское обследование.
24 часа нельзя принимать лекарственные средства. В последний день не стоит планировать спортивные тренировки, тяжелую физическую работу, эмоциональные нагрузки. Перед входом в лабораторию рекомендуется посидеть спокойно 15 минут.
Применение современных противовирусных средств позволяет успешно лечить вирусный гепатит С. Но для контроля за терапией, диагностикой состояния печени и активности воспаления необходимы методы вирусологического исследования. Цель современных разработок — внедрение простых недорогих, но достоверных экспресс-методик для массового обследования.